ABSTRACT
No presente estudo, a PCR foi utilizada para detectar leptospiras em urina humana. Diversas abordagens para processamento de amostra foram avaliadas para otimizar a detecção de leptospiras em urina misturada com esta bactéria. Além disso, algumas mudanças na composição da mistura de reação foram analisadas. Não se observou amplificação em urina ácida, conseqüentemente, a neutralização da amostra imediatamente após a coleta é fortemente recomendada. PBS apresentou melhores resultados que Tris ou NaOH como reagentes neutralizadores. Congelamento e descongelamento de amostras antes do processamento produziram resultados negativos. Eliminação de células epiteliais, leucócitos e cristais por centrifugação a 3.000rpm, à temperatura ambiente, aumentou a sensibilidade. Ademais, ambas, a etapa de lavagem após a coleta de leptospiras por centrifugação e a inclusão de albumina de soro bovino a 0,1 por cento na mistura de reação minimizaram a interferência de outros compostos inibidores. Essas modificações contribuíram para melhorar a detecção de Leptospira em urina através da PCR.
Subject(s)
Animals , Humans , Cattle , Leptospira , Polymerase Chain Reaction , Specimen Handling , Urine , Indicators and Reagents , Sensitivity and Specificity , Specimen HandlingSubject(s)
Humans , Acetaminophen/therapeutic use , Antiviral Agents/therapeutic use , Hantavirus Pulmonary Syndrome , Ribavirin/therapeutic use , Diagnosis, Differential , Hantavirus Pulmonary Syndrome/diagnosis , Hantavirus Pulmonary Syndrome/drug therapy , Hantavirus Pulmonary Syndrome/immunology , Hantavirus Pulmonary Syndrome/physiopathologyABSTRACT
Se analizan los resultados obtenidos con la técnica de la aglutinación macroscópica con Antígeno Termorresistente (TR) para el diagnóstico de la leptospirosis humana, frente a la técnica considerada estándar de referencia aglutinación microscópica (MAT), en 1.077 sueros de enfermos en el período octubre de 1991, estudiados en el Hospital F.J.Muñiz de la ciudad de Buenos aires. Los resultados se analizan, además, según los antecedentes epidemiológicos y datos clínicos. La sensibilidad global del TR respecto a la MAT fue del 97,7 por ciento , pero si se excluyen las MAT positivas por anticuerpos residuales, ésta es del 99 por ciento . La especificidad del TR resultó del 99,4 por ciento . La prueba de Macroaglutinación con Antígeno Termorresistente es de utilidad para el diagnóstico rápido de leptospirosis en Centros de baja complejidad o ante situaciones epidemiológicas que involucren poblaciones numerosas; pero deben confrontarse los resultados con la técnica de microaglutinación